菜青虫胰凝乳蛋白酶基因PrCT1的克隆及表达分析

• 作者: 严子成 周嘉裕 廖海 张娴 李超林 郑乔木
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 菜青虫 胰凝乳蛋白酶 克隆 原核表达 蛋白酶抑制剂 饥饿
• 年，卷（期）: 2019,（9）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 74-81
• 页数: 8页
• 分类号: S433.4
• 字数: 5875字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.09.011

摘要

胰凝乳蛋白酶是昆虫的主要消化酶,可能参与多种消化以外的生理过程.为了解该蛋白质基因表达特性,基于菜青虫(Pieris rapae)转录组数据,克隆了1个菜青虫胰凝乳蛋白酶基因PrCT1并进行相关分析.该基因编码区全长861 bp,编码286个氨基酸,含有典型的丝氨酸蛋白酶催化三联体(H57 、D102 、S195),经丝氨酸蛋白酶底物特异性口袋分析,显示其属于胰凝乳蛋白酶.PrCT1与黑脉金斑蝶胰凝乳蛋白酶(GenBank登录号:OWR53227)同源性最高,达到49％,且亲缘关系最近.构建pET28a-PrCT1原核表达重组载体,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株进行原核诱导表达.结果 发现,重组PrCT1蛋白以包涵体形式存在,分子质量为33.26 ku.利用实时荧光定量PCR检测菜青虫不同组织中PrCT1 mRNA表达及饥饿、决明胰蛋白酶抑制剂喂食处理后PrCT1 mRNA的表达情况显示,PrCT1基因主要在菜青虫的中肠中表达,且在饥饿、决明胰蛋白酶抑制剂喂食处理后表达水平均下调,推测PrCT1可能是菜青虫中肠中发挥食物消化作用的重要蛋白酶,且可能是重要的抗虫靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖海	西南交通大学生命科学与工程学院	56	197	9.0	11.0
2	周嘉裕	西南交通大学生命科学与工程学院	54	196	9.0	11.0
3	张娴	西南交通大学生命科学与工程学院	7	1	1.0	1.0
4	李超林	西南交通大学生命科学与工程学院	2	1	1.0	1.0
5	郑乔木	西南交通大学生命科学与工程学院	1	1	1.0	1.0
6	严子成	西南交通大学生命科学与工程学院	2	1	1.0	1.0