毛果杨丝氨酸蛋白酶抑制剂基因PtrSPI的克隆及真核表达

• 作者: 刁桂萍 杨帅 王志英 黄颖
• 来源期刊: 东北林业大学学报
• 关键词: 毛果杨 丝氨酸蛋白酶抑制剂 异源表达
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 页码范围: 88-92,98
• 页数: 6页
• 分类号: S763.3|Q785
• 语种: 中文

摘要

利用PCR技术从毛果杨(Populus trichocarpa)中分离得到1条丝氨酸蛋白酶抑制剂基因PtrSPI,该基因cDNA编码区全长为1176 bp,可编码391个氨基酸.BlastP预测结果显示,该丝氨酸蛋白酶抑制剂属于SERPIN超家族.多序列比对结果表明,毛果杨PtrSPI基因的氨基酸序列与已报道的胡杨(P.euphratica)丝氨酸蛋白酶抑制剂氨基酸序列XP 011030699同源性最高,相似性为92％,且蛋白的C端氨基酸序列都含有高度保守的反应中心环(RCL).在此基础上,成功构建了PtrSPI基因的重组真核表达载体pPICK-PtrSPI并获得了重组毕赤酵母菌株GS115-PtrSPI.利用终质量分数为0.5％甲醇诱导重组真核蛋白表达,SDS-PAGE电泳结果显示,在42648.45处出现了重组蛋白,与预期值一致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王志英		120	919	15.0	22.0
2	刁桂萍		16	35	4.0	5.0
3	黄颖		5	12	2.0	3.0
4	杨帅		16	47	4.0	6.0