1株脂肪酶产生菌的筛选鉴定及其脂肪酶基因的克隆表达

• 作者: 俆可瀚 刘义 刘修齐 刘小兰 刘德立 姚汉超 孟丽君 李娜 楼梦
• 来源期刊: 华中师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 菌株筛选 粘质沙雷氏菌 脂肪酶 克隆表达
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 444-449
• 分类号: Q819
• 字数: 3822字
• 语种: 中文

摘要

从武汉市郊蓖麻地土壤中分离到1株产脂肪酶菌株,结合形态观察和生理生化鉴定,扩增16S rDNA并测序,运用Blast比对构建了进化树,发现该菌与粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的同源性高达99％,初步鉴定该菌属于沙雷氏菌属(Serratia),命名为Serratia sp.HS-L5.克隆了脂肪酶基因HS-Lip5,该基因全长1 842 bp,编码氨基酸614个.序列经Blast比对分析发现与Serratiamarcescens SM6的lipA序列的同源性高达98％,经氨基酸序列初步分析,发现Serratia sp.HS-L5的氨基酸序列包含脂肪酶共有序列-G-X-S-X-G-.将HS-Lip5基因克隆到表达载体pET-28a,并在E.coli中获得了表达.