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多维离子交换色谱分离和串联质谱鉴定在小鼠肝脏膜蛋白质组分析中的应用
多维离子交换色谱分离和串联质谱鉴定在小鼠肝脏膜蛋白质组分析中的应用
作者:
任艳
刘斯奇
彭福利
徐宁志
王媛
王灼维
童维
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
多维离子交换色谱
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
反相高效液相色谱
串联质谱
膜蛋白质
小鼠肝脏
摘要:
膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解.根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质.将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4 mol/L 尿素,20 mmol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH 9.0)中,用Q-Sepharose FF和Sephacryl S-200HR树脂组成的色谱柱结合大部分溶解的膜蛋白质,然后采用氯化钠线性梯度洗脱蛋白质,分步收集后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进一步分离洗脱组分的蛋白质.利用胶内胰蛋白酶消化技术将SDS-PAGE胶内分离的蛋白质降解为相应的肽段,然后以反相高效液相色谱分离和离子阱质谱仪鉴定肽段.根据文献报道和蛋白质的功能分类,在所鉴定的392个蛋白质中有306个可能为膜蛋白质或膜结合蛋白质.蛋白质的疏水性计算表明,GRAVY(grand average of hydropathicity)得分大于或等于0.00的蛋白质有83个.综上所述,我们有理由认为本实验方法基本符合小鼠肝脏膜蛋白质组学研究的要求.
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文献信息
篇名
多维离子交换色谱分离和串联质谱鉴定在小鼠肝脏膜蛋白质组分析中的应用
来源期刊
色谱
学科
化学
关键词
多维离子交换色谱
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
反相高效液相色谱
串联质谱
膜蛋白质
小鼠肝脏
年,卷(期)
2010,(2)
所属期刊栏目
特别策划:色谱技术在蛋白质组学研究中的应用
研究方向
页码范围
115-122
页数
8页
分类号
O658
字数
7417字
语种
中文
DOI
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研究主题发展历程
节点文献
多维离子交换色谱
十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
反相高效液相色谱
串联质谱
膜蛋白质
小鼠肝脏
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
色谱
主办单位:
中国化学会
中国科学院大连化学物理研究所
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-8713
CN:
21-1185/O6
开本:
大16开
出版地:
大连市中山路457号
邮发代号:
8-43
创刊时间:
1984
语种:
chi
出版文献量(篇)
4384
总下载数(次)
10
总被引数(次)
67931
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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