柔嫩艾美耳球虫表面抗原(EtSAG)基因的分离及鉴定

• 作者: 姜连连 曾艳波 朱顺海 程军 董辉 赵其平 韩红玉 马卫娇 黄兵
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 表面抗原 克隆表达 抗原性分析
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 寄生虫
• 页码范围: 43-48
• 分类号: S852.723|Q781
• 字数: 4039字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2010.06.008

摘要

利用本实验室前期获得的柔嫩史美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊和未孢子化卵囊差异表达ESTs序列,选取编号为BW4-C03的孢子化卵囊,采用RACE技术,获得该基因全长序列.经BLAST分析,该序列与柔嫩艾美耳球虫表面抗原有72%以上的同源性,命名为EtSAG.利用荧光定量PCR(Real-time PCR)检测发现该基因在孢子化卵囊的转录拷贝数最高,且随着孢子化时间的延长,转录拷贝数逐渐增加.采用原核表达载体pET-28C表达该基因,得到的融合蛋白大小约为36 kDa,符合预期大小.经Western blot分析,该重组蛋白可被兔抗柔嫩艾美耳球虫的多克隆抗血清识别,表明该蛋白具有较好的反应原性.本研究结果为进一步研究该基因的生物学功能奠定了基础.