兔房水HPCE检测及其对培养角膜基质细胞的作用

• 作者: 卢春婷 唐光霞 李晓霞 李泽键 洪嘉凡 王升威 罗子源 陈建苏 麦志伟
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 房水 高效毛细管电泳(HPCE) 毛细管区带电泳(CZE) 角膜基质细胞 分离
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 页码范围: 374-377
• 分类号: R331
• 字数: 2792字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2010.04.009

摘要

目的:采用高效毛细管电泳(HPCE)的毛细管区带电泳(CZE)分离与检测兔房水中各蛋白组成,观察房水对培养角膜基质细胞的作用.方法:CZE 测定新西兰白兔房水蛋白成分:运行缓冲液硼酸钠-硼酸缓冲溶液(pH=8.7、9.1、9.4);毛细管柱温20 ℃;检测波长 200 nm;压力进样0.5 psi,进样时间10s;运行电压20 kV.第1代培养角膜基质细胞进行DMEM/F12培养,加入体积分数为10%的房水,CCK-8检测24 h后细胞增殖情况,每天倒置显微镜下观察细胞生长情况.结果:应用 pH=9.4的硼酸钠-硼酸缓冲溶液可获得分离效果较理想的兔房水毛细管电泳峰图.加入房水24 h后 CCK8检测吸光度增高(P＜0.05),角膜基质细胞生长良好.结论:HPCE可快速有效方便检测兔房水蛋白成分,体积分数为10%的兔房水可促进培养的兔角膜基质细胞生长与增殖.