GSTP1在先天性巨结肠症中蛋白质表达谱、甲基化检测与表达分析

• 作者: 伍美 姜中佳 张志波 苏真伟 高红 黄英
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 先天性巨结肠症 谷胱苷肽-S-转移酶 基因的表达与调控
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 199-205
• 分类号: R657.11
• 字数: 4591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2010.03.003

摘要

目的 利用双向凝胶电泳-基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术进行先天性巨结肠症(hirschsprung disease,HD)中蛋白质表达谱的研究;寻找HD中的生物标志物,为临床HD的早期无创性诊断提供依据.方法 分别提取20例HD患者配对狭窄段及正常段肠管组织的总蛋白质,进行双向凝胶电泳、银染,两组凝胶图像差异分析,得到差异蛋白质.对目的谷胱苷肽-S-转移酶1(glutathione S-transferase pi,GSTP1)蛋白质进行MALDI-TOF-MS质谱分析.运用甲基化特异性聚合酶链反应方法检测HD中GSTP1基因启动子区5′端 CpG 岛甲基化程度与表达.采用荧光实时定量PCR方法检测HD中GSTP1基因的mRNA 转录水平.结果 获得了分辨率较高的HD狭窄段及正常段肠管组织双向凝胶电泳图谱;得到阳性结果的差异蛋白质谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST).MSP 检测48 例HD,其中狭窄段肠管组织GSTP1基因高甲基化41例;而正常段肠管组织GSTP1基因甲基化仅7例.HD狭窄段肠管组织GSTP1基因mRNA表达低于正常段肠管组织(P<0.05).结论 利用双向凝胶电泳-MALDI-TOF-MS质谱技术检测HD组织差异蛋白质所获得的GSTP1蛋白可为寻找HD早期诊断的分子标记物提供理论依据;GSTP1基因异常甲基化、表达与HD的发生发展相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高红	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	136	641	12.0	17.0
2	张志波	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	70	291	9.0	12.0
3	伍美	中国医科大学附属盛京医院卫生部小儿先天畸形重点实验室	14	32	3.0	4.0
4	黄英	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	49	217	8.0	11.0
5	姜中佳	沈阳师范大学生化学院生物科学系	5	13	2.0	3.0
6	苏真伟	中国医科大学附属盛京医院小儿外科	3	4	1.0	2.0