5-脂氧化酶转基因小鼠模型的制备

• 作者: 于洋 吕相川 吴红联 周生来 张梅英 李兆阳 杨葳 王惟 王禄增 秦英 董婉维 郑志红
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 5-脂氧化酶 动脉粥样硬化 转基因
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 60-64
• 分类号: R711.75
• 字数: 3720字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2010.01.015

摘要

目的 建立5-脂氧化酶(5-LO)转基因小鼠进行动脉粥样硬化的发病分子机制的研究.方法 通过显微注射的方法,将5-脂氧化酶基因片段(6.8 kb)导入BDF1受精卵雄原核并移植到同期受孕的假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行PCR、Southern blot检测,对9、20、24号转基因小鼠分别提取腹腔细胞、骨髓细胞及脾、肾组织总RNA和蛋白,并采用RT-PCR、Western blot方法进行转录水平检测和蛋白表达检测.结果 共产生25只子代小鼠,经PCR和Southern检测获得7只阳性小鼠,经RT-PCR和Western blot检测结果表明,9、20、24号转基因小鼠腹腔细胞、骨髓细胞、脾、肾5-LO和5-脂氧化酶激活蛋白(FLAP)在RNA和蛋白水平表达均高于正常BDF1对照小鼠,且统计学分析腹腔细胞、骨髓细胞表达均具有显著差异(P<0.05).结论 成功建立5-LO转基因小鼠模型.