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日的:观察β-微管蛋白Ⅲ(13-Tubulin Ⅲ,TUBB3)反义寡核苷酸(Antisense oligonucleotide,ASODN)对Ec9706/P-1细胞凋亡的影响.方法:以体外诱导的人食管癌紫杉醇耐药细胞株Ec9706/P-1为模型,设ASODN组和无关序列寡核苷酸(Nonsense oligonucleotide,NSODN)组,应用免疫细胞化学方法检测NF-κBppabp65、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测NF-κBppabp65、bcl-2和caspase-3mRNA的表达;采用DNA凝胶电泳和吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡变化.结果:免疫细胞化学方法显示ASODN组NF-κBppabp65蛋白表达率与NSODN组比较差异无统计学意义(P>0.05),ASODN组Bcl-2蛋白表达率与NSODN组比较差异有统计学意义(P<0.05).ASODN组Caspase-3蛋白表达率与NSODN组比较.差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR法显示ASODN组caspase-3 mRNA条带亮度强于NSODN组,bcl-2 mRNA条带亮度低于NSODN组,ASODN组NF-κBppab mRNA条带亮度与NSODN组相近;DNA凝胶电泳显示紫杉醇作用后ASODN组有凋亡特征的DNA改变,而NSODN组细胞却未出现;吖啶橙荧光染色法表明ASODN组凋亡率与NSODN组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:TUBB3反义寡核苷酸增加了紫杉醇对Ec9706/P-1细胞的诱导凋亡能力,证明了Bcl-2和Caspase-3的表达变化很可能是产生紫杉醇耐药的主要机制之一.
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内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 Beta-微管蛋白ⅢASODN对Ec9706/P-1细胞凋亡的影响
来源期刊 河南大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 β-微管蛋白Ⅲ 食管癌 耐药 凋亡
年,卷(期) 2010,(3) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 164-169
页数 分类号 R735.1
字数 4347字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1672-7606.2010.03.003
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作者信息
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1 卢红 河南大学淮河医院肿瘤科 26 147 6.0 11.0
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