hAFP(137-145)肽段修饰树突细胞诱导细胞毒性T淋12细胞对肝癌细胞的杀伤效应

• 作者: 孙建海 彭明娥 马燕凌
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 甲胎蛋白 树突细胞 肝癌 细胞毒性T淋巴细胞 过继免疫治疗
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 6-12,37
• 页数: 8页
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的:通过体外杀伤试验,研究人肝癌特异性甲胎蛋白hAFP(137-145)短肽段修饰树突细胞(DC)后诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对人肝癌细胞的特异杀伤效应,并与完整hAFP蛋白的杀伤效应相比较.方法:选取健康人外周血单个核细胞,体外诱导成熟DC;构建hAFP表达载体,在BL21细菌中异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导原核表达后纯化,与合成的hAFP(137-145)短肽段分别修饰诱导DC细胞,体外刺激细胞毒性T细胞(CTL),通过流式细胞仪法和细胞毒性检测试剂盒法检测修饰后的DC所诱导的CTL在体外对肝癌细胞株的杀伤作用;构建荷瘤裸鼠人HepG2肝癌模型,检测该肽段修饰DC后诱导的CTL细胞在裸鼠过继体内实验中对人肝癌转移瘤的杀伤作用.结果:成功构建了pET-hAFP表达载体,原核表达并纯化后用Western blot检测到hAFP蛋白的表达;hAFP蛋白和hAFP(137-145)短肽段均能在体外修饰和诱导DC细胞的增殖和成熟;hAFP蛋白和hAFP(137-145)短肽段修饰DC体外均能诱导特异性CTL,并通过体外实验验证了其对于肝癌细胞的杀伤效应,其中hAFP(137-145)短肽段诱导CTL的能力和所诱导CTL对于肝癌细胞的杀伤能力相对全长hAFP蛋白较强;动物实验证实,该hAFP(137-145)肽段修饰DC后诱导的CTL细胞在荷瘤裸鼠过继体内实验中对人肝癌转移瘤有明显的杀伤作用,杀伤效率优于完整hAFP蛋白.结论:hAFP蛋白和hAFP(137-145)短肽段修饰DC均具有单独体外诱导特异性CTL的作用,体外实验和动物实验均证实此CTL有特异地杀伤HegG2肝癌细胞的作用;hAFP(137-145)短肽段诱导CTL效率和杀伤肿瘤细胞效率均优于完整hAFP蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马燕凌	湖北省中山医院肿瘤科	17	56	5.0	7.0
2	孙建海	湖北省中山医院肿瘤科	20	63	5.0	7.0
3	彭明娥	湖北省中山医院肿瘤科	8	34	4.0	5.0