PCR-RFLP技术在布氏菌鉴定与分型中的应用

• 作者: 崔恩博 曲芬 李波 毛远丽 郭桐生
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 布氏菌属 RNA,核糖体,16S 聚合酶链反应 多态性,限制性片段长度
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 感染性疾病病原诊断研究专题
• 页码范围: 241-243
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文

摘要

目的 利用PCR-RFLP技术扩增7株布氏菌临床分离株16S RNA基因片段,为该菌的分子诊断学、遗传学和流行病学研究提供实验依据.方法 参考GenBank公布的布氏菌ATCC 25840标准株序列,设计针对该菌16S RNA保守区的特异性引物,从临床分离培养7株布氏菌,提取DNA并行16S RNA片段的PCR扩增.将PCR产物克隆至PGEM-T载体进行测序并选用合适的限制性内切酶进行RFLP分析,将分析结果用于临床株的同源性及变异位点的研究,并对感染患者的临床资料进行回顾性分析,研究不同布氏菌基因型与感染患者临床特征的相关性.结果 利用PCR扩增出的目的片段与预期一致,大小约为1500bp.测序及同源性分析表明,7株临床分离株之间存在98.88%的同源性和11个变异位点.RFLP结果将7株菌分为4个基因型,临床资料回顾性分析患者不同基因型与临床表现之间无明显联系.结论 利用PCR技术扩增布氏菌16S RNA基因片段可以实现对该菌的早期诊断,为布氏菌的分子遗传学和流行病学提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曲芬	解放军302医院临床检验中心	36	160	8.0	10.0
2	毛远丽	解放军302医院临床检验中心	27	165	7.0	12.0
3	崔恩博	解放军302医院临床检验中心	25	89	5.0	8.0
4	李波	解放军302医院临床检验中心	9	16	3.0	4.0
5	郭桐生	解放军302医院临床检验中心	15	73	5.0	8.0