肠道病毒71型血清学检测方法的建立及应用

• 作者: 侯俊 刘爱霞 徐军 李伯安 李鲁平 杨静 毛远丽 聂为民 郭静霞 马洪滨
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 基因,VP1 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 感染性疾病病原诊断研究专题
• 页码范围: 239-240
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文

摘要

目的 在原核表达系统中对肠道病毒71型(EV71)基因进行克隆、表达、纯化,建立血清IgM抗体的检测方法,用于EV71感染的早期诊断.方法 检索EV71 VP1基因序列,设计合成引物,并在引物两端插入酶切位点,采用RT-PCR分离EV71 VP1全基因序列.PCR产物回收、纯化,插入T载体进行序列同源性测定.再插入表达质粒载体pRSET,构建pRSFT-EV71重组质粒.利用纯化后的表达产物,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测EV71 IgM抗体.共收集31例临床诊断为手足口病患儿及36例健康儿童的血清标本进行检测.结果 PCR产物片段大小约890bp,与预期VP1全基因序列长度一致,并且克隆入T载体后序列测定与GenBank公布序列的同源性达100%;重组蛋白大小约为890bp,与预期蛋白片段一致.ELISA检测结果显示,在手足口病患儿中IgM抗体阳性7例,健康儿童中则未发现阳性,差异有统计学意义.结论 成功建立了针对EV71 IgM抗体的检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛远丽		27	165	7.0	12.0
2	徐军		9	73	4.0	8.0
3	杨静		13	21	3.0	4.0
4	侯俊		5	58	2.0	5.0
5	聂为民		7	31	3.0	5.0
6	李鲁平		16	77	6.0	8.0
7	马洪滨		10	83	4.0	9.0
8	李伯安		10	42	4.0	5.0
9	郭静霞		4	57	2.0	4.0
10	刘爱霞		2	12	2.0	2.0