人正常软骨细胞和骨性关节炎软骨细胞体外培养对照研究

• 作者: 周琦 朱亚萍 李笑颜 杜宁 胡炯 邓廉夫 魏义勇 魏立 齐进
• 来源期刊: 中国中医骨伤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨关节炎 软骨细胞 体外培养 细胞培养 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 8-12
• 页数: 5页
• 分类号: R684.3
• 语种: 中文

摘要

目的:对人正常软骨细胞和骨关节炎软骨细胞进行体外培养,并就其2组在传代过程中生物学特性变化进行比较和评价.方法:酶两步顺序消化法消化关节软骨分离细胞;体外传代培养观察细胞形态、生长,MTT法测定增殖,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫组化染色,从蛋白和基因水平检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖的变化,以及用流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:①骨性关节炎软骨细胞形态似成纤维细胞,生长速度明显较正常软骨细胞慢.②MTT检测骨关节炎组2、4、6代软骨细胞增殖均低于正常组(P<0.05),Ⅱ型胶原免疫组化和甲苯胺蓝O染色均较弱,传至第4代软骨细胞生物学特性基本消失.③2、4代骨关节炎软骨细胞凋亡率明显高于正常软骨细胞(P<0.05)④各代骨性关节炎软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达量都不如正常软骨细胞.结论:体外培养的人骨性关节炎软骨细胞符合软骨细胞退变的表现,能很好的为骨关节炎细胞水平的研究提供最佳实验对象.