1型HIV感染多重PCR检测方法的建立及临床应用

• 作者: 代丽丽 刘志英 吴亚松 吴昊 张彤 张洪海 梁连春 石英 陈德喜 魏飞力
• 来源期刊: 首都医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒 核酸检测 聚合酶链式反应 诊断
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 687-694
• 分类号: R5
• 字数: 6700字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7795.2010.06.001

摘要

目的 建立检测人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的多重巢式PCR(nPCR)和多重反转录PCR(RT-PCR)方法.将其与已经上市的NASBA法试剂盒进行检测敏感性比较;探讨血浆RNA水平对PCR检测敏感性的影响;评价该方法用于我国HIV-1感染者诊断的价值.方法 针对HIV-1的gag、pol和gp41区设计3套引物,建立检测HIV DNA的多重nPCR和检测HIV RNA的多重RT-PCR方法;分别以建立的PCR方法和NASBA法对119例HIV阳性患者进行检测,比较2者的检测敏感性;将患者分为不同的病毒载量组,比较PCR方法在各组患者中的检测敏感性差异;使用建立的PCR方法对10例可疑急性感染者进行检测;扩增HIV-1膜区C2-C3段,对nPCR检测阳性的43例DNA样本进行亚型鉴定.结果 多重nPCR的检测敏感度为97.5%(116/119),多重RT-PCR的敏感度为78.2%(93/119),2者的特异度均为100%(50/50),多重nPCR和多重RT-PCR的阳性预测值分别为97.5%(116/119)和78.2%(93/119),阴性预测值均为100%(50/50),准确性分别为98.2% 和84.6%.经比较,多重nPCR和多重RT-PCR的检测敏感度都高于NASBA法.在病毒载量<103 copy/mL的患者,nPCR的检测敏感性高于RT-PCR,在病毒载量在(103～104)copy/mL的患者及病毒载量≥104 copy/mL的患者,2者的敏感性比较相近,均接近100%;检测的10例可疑急性感染者中,有5例患者的nPCR和RT-PCR检测结果阳性,抗体在随访过程中阳转,证实为HIV急性感染者;检测的43例DNA样本分属于B'亚型(37例),AE亚型(5例)和BC亚型(1例).结论 本课题组建立的PCR检测方法可以对我国主要流行的B'、AE和BC亚型病毒株得到很好的扩增效果;nPCR的检测敏感性受血浆RNA水平的影响相对较小,RT-PCR的检测敏感性受血浆RNA水平的影响相对较大;PCR方法可以用于HIV急性感染者的早期诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴昊	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	341	1409	17.0	25.0
2	陈德喜	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	154	453	11.0	13.0
3	梁连春	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	88	386	10.0	16.0
4	石英	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	51	149	6.0	9.0
5	魏飞力	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	20	67	4.0	6.0
6	张洪海	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	33	227	6.0	14.0
7	刘志英	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	28	79	5.0	7.0
8	代丽丽	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	29	102	6.0	9.0
9	吴亚松	首都医科大学附属北京佑安医院感染中心	20	75	5.0	7.0