染色体特异DNA文库的构建与鉴定

• 作者: 刘新雄 卓永光 孙雷 张明 樊祖茜 符可鹏 陆阳清 陈哲
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 21号染色体 染色体微分离与微切割 DOP-PCR 染色体特异 DNA 文库
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 824-828
• 分类号: Q5
• 字数: 4278字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1005.2010.00824

摘要

为构建人类21号染色体特异DNA文库,以应用于人类遗传疾病的鉴定和研究,文章采用循环温度梯度法溶解释放微分高的人外周血细胞21号染色体DNA,将其进行简并寡核苷酸引物PCR(Degenerate oligo nucleotide primer-PCR,DOP-PCR)扩增后,利用100～500 bp和500～2 000 bp分段回收纯化的两种不同片段大小的DOP-PCR产物构建染色体特异DNA文库,并分别采用荧光原位杂交(Florescence in situ hybridization,FISH)和斑点杂交对DOP-PCR 产物的来源和随机取样的文库克隆进行检测以评估所构建DNA文库的特异性.结果表明:循环温度梯度法能有效溶解释放微分高的21号染色体DNA;通过对DOP-PCR产物的分段回收纯化和克隆,增加了大片段DNA的连接效率;利用FISH技术和斑点杂交双重鉴定实验证明了文库的特异性,从而构建了21号染色体特异的DNA文库,并建立了构建染色体特异DNA文库及检测其特异性的方法,为21号染色相关遗传疾病的鉴定和研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张明	广西大学动物繁殖研究所	59	209	6.0	12.0
2	刘新雄		10	31	4.0	5.0
3	陈哲		5	7	1.0	2.0
4	孙雷		16	14	3.0	3.0
5	卓永光		4	6	2.0	2.0
6	陆阳清	广西大学动物繁殖研究所	24	105	5.0	10.0
7	樊祖茜		6	6	1.0	2.0
8	符可鹏		9	10	2.0	3.0