鸡柔嫩艾美耳球虫CDPK和鸡IFN-γ重组质粒的构建与体外表达

• 作者: 尹燕博 徐守振 李卫华 汪明
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 重叠延伸聚合酶链反应 CDPK基因 IFN-γ基因 共表达
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 920-924
• 页数: 5页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

采用SOE-PCR技术将鸡柔嫩艾美耳球虫CDPK抗原基因与鸡干扰素-γ(IFN-γ)基因用(GGGGS)315个疏水柔性氨基酸接头融合,扩增出IFN-γ-CDPK融合基因,将其克隆到pMAL-p2X载体上,构建了重组原核表达质粒pMAL-IFN-γ-CDPK,用IPTG诱导表达并纯化重组蛋白,经免疫印迹分析该蛋白的生物学活性.结果显示,成功构建了共表达IFN-γ-CDPK融合基因的原核表达栽体,表达纯化了具有良好的免疫反应性的IFN-γ-CDPK融合蛋白,表达纯化的IFN-γ-CDPK融合蛋白能够和鸡柔嫩艾美耳球虫甘肃株抗血清发生特异性结合,为进一步研制高效力的鸡球虫新型基因工程疫苗奠定了基础.