鸡艾美耳球虫3-1E基因的克隆与表达

• 作者: 吴志光 周建民 汪明 潘保良
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 艾美耳球虫 3-1E 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-6
• 页数: 4页
• 分类号: S858.315.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2004.12.001

摘要

应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,分别从柔嫩艾美耳球虫甘肃株(E.tenella GS,Et GS)和堆型艾美耳球虫青海株(E.acervulina QH,Ea QH)孢子化卵囊子孢子中提取的总RNA扩增得到鸡球虫子孢子表面抗原3-1E基因(Et GS 3-1E和Ea QH 3-1E).将Et GS 3-1E与原核表达载体pGEX-6P1连接,构建了的pGEX-3-1E原核表达质粒,并获得融合蛋白的高效表达和纯化.序列分析表明:Et GS 3-1E和Ea QH 3-1E的ORF均为513个碱基,共编码171个氨基酸.Et GS 3-1E的蛋白分子量为18.5 kD,Ea QH 3-1E的蛋白分子量为18.6 kD.ORF比较,Et GS 3-1E与文献报道的Ea 3-1E比较,共有2个核苷酸发生变异,核苷酸同源性为98.8%,有1个氨基酸发生变异,氨基酸同源性为99.4%;Ea QH 3-1E与文献报道的Ea 3-1E比较,共有4个核苷酸发生变异,核苷酸同源性为97.7%,有3个氨基酸变异,氨基酸同源性为98.3%;Et GS 3-1E与Ea QH 3-1E比较,有3个核苷酸发生变异,核苷酸同源性为98.2%,有 2个氨基酸发生变异,氨基酸同源性为98.8%.获得了Et GS 3-1E融合蛋白的高效表达和纯化,表达率达43.2%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪明	中国农业大学动物医学院	260	2264	23.0	31.0
2	吴志光	中国农业大学动物医学院	16	400	11.0	16.0
3	潘保良	中国农业大学动物医学院	40	285	11.0	15.0
4	周建民	中国农业大学动物医学院	7	48	4.0	6.0