N-乙酰半胱氨酸通过抑制活性氧-p38通路减轻缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞凋亡

• 作者: 居维竹 张凤祥 曹克将 杨兵 王静 陈明龙 陈红武
• 来源期刊: 中华心血管病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心肌 乙酰半胱氨酸 细胞凋亡 缺氧复氧
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 445-449
• 分类号: R9
• 字数: 3779字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3758.2010.05.016

摘要

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)抑制缺氧复氧(hypoxia-reoxygenation,H/R)诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的机制.方法 心肌细胞培养48 h后随机分为对照组、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+NAC组(100 p.mol/L)(H/R+NAC组).H/R组心肌细胞先缺氧6 h,随后复氧72 h,H/R+NAC组在H/R组细胞培养液中加NAC(100 μmol/L).采用锥虫蓝检测心肌细胞活性.流式细胞仪与Annexin V测定细胞早期凋亡.TUNEL检测细胞晚期凋亡.活性氧绿色荧光显色试剂检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)浓度.RT-PCR检测bcl2、bax基因mRNA水平.Western blot检测bel2、bax、p38与pp38基因蛋白水平.结果 H/R组有活性的细胞数量为74.9%,显著低于对照组(93.5%,P<0.01),H/R+NAC组有活性的细胞数为89.9%,显著高于H/R组(P<0.01).H/R组早期凋亡的心肌细胞数为25.2%,显著高于对照组(6.5%,P<0.01),H/R+NAC组早期凋亡的细胞数为11.1%,显著低于H/R组(P<0.01).H/R组晚期凋亡的心肌细胞数为33.5%,显著高于对照组(3.5%,P<0.01),H/R+NAC组晚期凋亡的细胞数为13.5%,显著低于H/R组(P<0.01).H/R组心肌细胞ROS产生显著高于对照组,H/R+NAC组心肌细胞ROS产生显著低于H/R组.H/R组pp38/p38条带密度比值(13.40)也显著高于对照组(3.89).H/R+NAC组pp38/p38条带密度比值(1.95)显著低于H/R组(13.4),P<0.01.H/R组bcl2 mRNA与蛋白水平显著低于对照组,bax mRNA与蛋白水平显著高于对照组.H/R+NAC组bcl2 mRNA与蛋白水平显著高于H/R组.H/R+NAC组bcl2/bax mRNA水平比值(1.79)显著高于H/R组(1.22),P<0.05,但仍低于对照组(1.85).H/R+NAC组bcl2/bax条带密度比值(0.71)显著高于H/R组(0.50),P<0.05,但仍低于对照组(2.53).结论 NAC通过抑制ROS-p38通路减轻缺氧复氧诱导的乳鼠心肌细胞凋亡,这一作用具有潜在的临床应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹克将	南京医科大学第一附属医院心脏科	349	2181	20.0	32.0
2	陈明龙	南京医科大学第一附属医院心脏科	132	673	13.0	20.0
3	王静	南京医科大学第一附属医院心脏科	66	197	8.0	10.0
4	杨兵	南京医科大学第一附属医院心脏科	100	495	11.0	17.0
5	陈红武	南京医科大学第一附属医院心脏科	41	178	7.0	11.0
6	张凤祥	南京医科大学第一附属医院心脏科	40	185	7.0	12.0
7	居维竹	南京医科大学第一附属医院心脏科	32	135	6.0	10.0