荧光显色在环介导等温扩增(LAMP)检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的应用

• 作者: 付萍 吴文学 张跃伟 李佳禾 李旭妮 蒋菲 郭盼盼 黄书林
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 反转录环介导等温扩增(RT-LAMP) 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) RT-PCR 荧光显色剂
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 508-513
• 分类号: S8
• 字数: 4579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.03.015

摘要

介绍了一种应用荧光显色的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)的检测方法.该方法使用了针对靶序列M+N基因的一组引物,并且能在63 ℃等温条件下30 min内完成反应.在敏感性检测中RT-LAMP与RT-PCR都能检测103个包含靶基因片段的重组质粒.几种其它病原的核酸也被用来比较这两种方法的特异性,两种方法只能检测PRRSV.在荧光显色剂应用试验中,证实0.05 mmol/L钙黄绿素以及0.6 mmol/L锰离子可以用于LAMP扩增产物的判断,并且其判断结果与浊度判断结果一致.在对103个临床血液样本的检测中,RT-LAMP与RT-PCR检出的阳性样本数量分别是56个和48个.结果说明,应用荧光显色剂的RT-LAMP检测方法可以快速检测PRRSV.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋菲	中国农业大学动物医学院	7	104	6.0	7.0
2	黄书林	中国农业大学动物医学院	7	112	6.0	7.0
3	张跃伟	中国农业大学动物医学院	8	134	7.0	8.0
4	吴文学	中国农业大学动物医学院	29	418	10.0	20.0
5	李佳禾	中国农业大学动物医学院	6	107	5.0	6.0
6	付萍	中国农业大学动物医学院	5	95	5.0	5.0
7	郭盼盼	中国农业大学动物医学院	4	96	4.0	4.0
8	李旭妮	中国农业大学动物医学院	3	59	2.0	3.0