体内电穿孔在质粒介导的基因转移及DNA免疫中的应用

• 作者: 刘勇 周芳 张宪省 张舟 徐智勇 邵一鸣 陈佩
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 体内电穿孔 DNA疫苗 基因表达 免疫应答
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 551-554
• 分类号: R3
• 字数: 2935字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.06.015

摘要

目的 研究体内电穿孔技术对于质粒DNA介导的体内基因表达以及HIV-1 Env DNA疫苗免疫效果的影响.方法 将携带荧光素酶Luciferase基因的表达质粒p1.0-Luc和携带HIV-1 CN54 env基因的DNA疫苗质粒p1.0-gp1455m通过单独肌肉注射或肌肉注射后加电穿孔两种不同方法 注射小鼠.用IVIS(R)活体成像系统实时检测Luciferase报告基因在体内的表达情况.用ELISA检测HIV-1 Env特异的抗体反应,用IFN-γ ELISPOT检测HIV-1 Env特异的T细胞免疫反应.结果 体内电穿孔技术可以显著提高Luciferase在小鼠体内的表达水平,幅度达35倍.HIV-1 Env DNA疫苗免疫结果 显示,8μg质粒剂量电穿孔途径诱导的体液和细胞免疫应答强于40μg质粒剂量单纯肌肉注射组;体内电穿孔途径免疫2次与单纯肌肉注射途径免疫3次诱导的体液和细胞免疫应答水平相当.结论 体内电穿孔技术可以大幅度提高报告基因在体内的表达水平和DNA疫苗的免疫应答.