大肠杆菌pqqL基因敲除与功能分析

• 作者: 张惟材 杨璐 汪建华 熊向华 韩晓东
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 吡咯喹啉醌 Red 同源重组 基因敲除
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 1380-1384
• 分类号: S811.6
• 语种: 中文

摘要

[目的]通过构建大肠杆菌pqqL基因缺陷突变株,研究大肠杆菌pqqL基因的功能.[方法]首先通过PCR扩增得到pqqL基因和kan抗性基因,在体外构建线性打靶片段pqqL-kan-pqqL.然后通过Red同源重组敲除大肠杆菌的pqqL基因,构建大肠杆菌缺失突变体DH5αΔpqqL.在此基础上通过DCIP法检测山梨糖脱氢酶活性来比较大肠杆菌突变株与亲本株中PQQ合成的情况.[结果]成功敲除了大肠杆菌的pqqL基因,DCIP法检测结果显示大肠杆菌pBCP162/DH5αΔpqqL和pMD19T Simple-pqqABCDE/DH5α能够合成PQQ,而大肠杆菌pMD19T Simple-pqqABCDE/DH5αΔpqqL不能合成PQQ.[结论]大肠杆菌pqqL基因和pqqF基因具有同样的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊向华	军事医学科学院生物工程研究所	46	135	6.0	9.0
2	汪建华	军事医学科学院生物工程研究所	46	163	6.0	10.0
3	张惟材	军事医学科学院生物工程研究所	75	603	13.0	22.0
4	杨璐	军事医学科学院生物工程研究所	2	3	1.0	1.0
5	韩晓东	军事医学科学院生物工程研究所	2	16	2.0	2.0