大肠杆菌nmpC基因的快速敲除

• 作者: 华秀庭 张丹凤 陈国平 陈阳
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: Red重组系统 Xer重组系统 大肠杆菌 NmpC
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 160-164
• 语种: 中文

摘要

旨在利用Red重组系统和Xer重组系统获得大肠杆菌NmpC外膜蛋白基因删除菌株.采用PCR扩增nmpC基因片段,构建pMD-nmpC载体,EcoR Ⅰ酶切并经Pfu补平酶切缺口后与difGm片段连接,得到重组质粒T-nmpC::difGm,PCR扩增获得突变盒nmpC::difGm,电转化突变盒片段入大肠杆菌细胞,PCR扩增验证是否获得没有抗性标记的△nmpC基因删除菌株.结果显示,成功构建了重组质粒T-nmpC::difGm,在Red重组酶和Xer重组酶的介导下,进行同源重组和抗生素标记去除,并经PCR验证得到△ nmpC基因删除菌株.首次成功获得大肠杆菌△nmpC无抗生素标记基因删除菌株,该基因删除菌株可为深入研究NmpC的功能提供研究基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丹凤	漳州师范学院生物科学与技术系	8	24	2.0	4.0
2	陈阳	漳州师范学院生物科学与技术系	2	3	1.0	1.0
3	华秀庭	漳州师范学院生物科学与技术系	1	1	1.0	1.0