内参PCR法在布鲁氏菌病诊断中的应用

• 作者: 刘丽娅 叶锋 吐尔洪江·努尔 易新萍 李博 李金平 谷文喜 钟旗 闫晶华
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁氏菌 内参PCR法 检测
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 疫病防治
• 页码范围: 55-58
• 分类号: S855.99
• 字数: 4077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2010.05.030

摘要

本试验以布鲁氏菌致病力因子VirB7下游至VirB9上游基因序列为目的扩增片段,设计上、下游引物,优化血样、奶样中布鲁氏菌基因组DNA的提取方法,建立布鲁氏菌内参PCR(IR-PCR)检测方法,用于血液、奶液样本中布鲁氏茵的检测.结果显示,内参PCR法有效地降低了PCR法诊断布鲁氏菌的假阴性率,且检测结果与常规的布鲁氏茵的诊断方法(细菌培养分离鉴定、iELASA)一致,该方法不仅提高了常规布鲁氏菌诊断方法的效率及灵敏度,而且降低了其假阴性和假阳性率.对血样、奶样的检出量分别为35CFU/mL、350 CFU/mL,适合于血样、奶样中布鲁氏菌的检测.