5种方法提取弓形虫速殖子DNA的效果比较

• 作者: 周永华 李冬娜 沈海英 王廷安 申云侠 诸葛洪祥
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫速殖子 DNA提取 PCR 电泳
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 333-336
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 2982字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.04.009

摘要

目的 用5种方法提取弓形虫速殖子基因组DNA,比较其效果.方法 分别以试剂盒法、直接裂解法、煮沸法、酚-氯仿法和盐析法提取10倍系列稀释的弓形虫速殖子DNA,通过分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和PCR比较其效果.结果 酚-氯仿法提取的DNA纯度最高,煮沸法、盐析法、直接裂解法和试剂盒法依次降低;琼脂糖凝胶电泳可检测出由直接裂解法、酚-氯仿法、盐析法提取1×106个速殖子的基因组DNA;试剂盒法、直接裂解法、煮沸法、酚-氯仿法、盐析法提取的DNA经PCR扩增可检测最少速殖子的数量依次为1×104 ,无目的条带,1×102,1×101,1×103个. 结论酚-氯仿提取的DNA纯度高,用于PCR扩增具有较高的敏感性,但操作相对繁琐;煮沸法操作简单,与除酚-氯仿法外其他3种方法相比具有较高的敏感性.其它3种方法提取的DNA纯度不高,用于PCR扩增的效果不如前面2种.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	诸葛洪祥	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	57	298	10.0	13.0
2	周永华		7	22	3.0	4.0
3	王廷安	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	4	16	2.0	4.0
4	沈海英	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	8	82	2.0	8.0
8	申云侠	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	3	13	2.0	3.0
9	李冬娜	苏州大学医学部基础医学与生物科学学院病原生物学系	1	2	1.0	1.0