BCB筛选后的绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的差异性分析

• 作者: 林嘉鹏 汪立芹 王静 石庆华 赵云程 陈博 黄俊成
• 来源期刊: 中国草食动物
• 学科: 农学
• 关键词: BCB染色 母源基因 荧光实时定量PCR
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 5-9
• 分类号: S826.2
• 字数: 3916字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-3887.2010.05.001

摘要

卵母细胞的胞质成熟对于受精后正常的胚胎发育是至关重要的,亮甲酚蓝染色液(BCB)能有效筛选出胞质成熟卵母细胞.为详细了解BCB筛选出的不同质量绵羊卵母细胞中母源基因mRNA的表达量的差异性,从而证明BCB对绵羊卵母细胞筛选的可行性和可靠性,判断4种母源基因与卵母细胞的胞质成熟是否有关,为哺乳动物卵母细胞成熟和早期胚胎发育分子机理的研究提供参考.本实验将卵母细胞置于BCB染色液中,细胞质着蓝色的为BCB+,没着蓝色的为BCB-;并利用荧光实时定量PCR技术检测4种母源基因Gdf9(生长分化因子-9)、Zar1(合子阻泄因子)、Mater(胚胎必要的母体抗原)和Dnmt1(DNA甲基化转移酶1)在不同质量绵羊卵母细胞中的mRNA含量.结果表明:BCB染色筛选后,阴性卵母细胞4种基因的mRNA表达量比阳性高(P<0.01),这充分证明,BCB能有效筛选出胞质成熟度好的绵羊卵母细胞,这4种母源基因与卵母细胞的胞质成熟有关.