转染组织因子胞内段siRNA阻抑人脐静脉内皮细胞凋亡的体外实验

• 作者: 刘峥嵘 周浩 李泉 葛超 邹萍 韩红 黎纬明
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 凝血致活酶 细胞内 内皮细胞 细胞凋亡 RNA,小分子干扰
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 114-117
• 页数: 4页
• 分类号: R6
• 字数: 3377字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2010.02.014

摘要

目的 探讨转染组织因子胞内段小片段干扰RNA(siRNA)对血管内皮细胞凋亡的影响.方法 体外设计组织因子胞内段siRNA Ⅰ和siRNAⅡ,插入质粒DNA后用脂质体将其转入人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)中.3组HUVEC分别转染siRNAⅠ质粒(siRNAⅠ组)、siRNAⅡ质粒(siRNAⅡ组)和pc DNA~(TM)6.2GW/-miR质粒(对照组).取各组HUVEC细胞,分别与CD8~+ T淋巴细胞进行混合淋巴细胞反应.用流式细胞仪检测混合淋巴细胞反应中HUVEC的凋亡率,用磁珠法检测混合淋巴细胞反应上清液中活化部分凝血活酶时间(APTT).结果 插入的siRNA经过测序,证实为正确序列.HUVEC转染siRNA后24 h及48 h,siRNAⅠ组和siRNAⅡ组HUVEC的凋亡率均低于对照组(P<0.01).siRNA Ⅰ组HUVEC的凋亡率低于siRNAⅡ组(P<0.05).3组上清液的APTT较对照(RPMI 1640培养基)缩短(4±0.46)s(P<0.05).siRNA Ⅰ组和siRNAⅡ组与对照组相比较,APTT的差异无统计学意义(P>0.05).结论 组织因子胞内段siRNA构建成功.转染该siRNA可在不影响凝血功能的情况下对混合淋巴细胞反应中的内皮细胞起到一定保护作用,减少内皮细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹萍	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	258	977	13.0	18.0
2	周浩	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	26	394	7.0	19.0
3	黎纬明	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	68	222	7.0	11.0
4	刘峥嵘	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	7	30	3.0	5.0
5	李泉	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	30	184	8.0	12.0
6	韩红	华中科技大学同济医学院附属梨园医院血液科	20	63	3.0	7.0
7	葛超	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	2	1	1.0	1.0