人组织激肽释放酶基因重组腺病毒转染对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

• 作者: 余惠珍 朱鹏立 李体远 王华军 许昌声 谢良地
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 组织激肽释放酶1 基因转移 细胞增殖 细胞迁移 血管平滑肌细胞
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 662-668
• 页数: 7页
• 分类号: R363
• 字数: 5329字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2010.04.008

摘要

目的:探讨重组腺病毒介导的人组织激肽释放酶(hKLK1)基因转移对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导下的自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMC_(SHR))增殖和迁移的影响.方法:自行构建双顺反子重组腺病毒载体,携带强绿色荧光蛋白(EGFP)标志基因和目的基因hKLK1;用细胞计数法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞生长周期;蛋白免疫印迹法(Western blotting)测定细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27~(Kip1)、p21~(Cip1)的表达.采用改良Boyden微孔膜双槽法测定VSMC_(SHR)迁移.结果:(1)hKLK1基因转移呈感染复数依赖性(20-100 MOI)抑制PDGF-BB诱导的VSMC_(SHR) 生长,100 MOI时抑制率为39.3%;呈时间依赖性抑制VSMC_(SHR) 生长,第5 d时达高峰,抑制率为35.2%.(2) hKLK1基因转移可显著抑制PDGF-BB诱导的VSMC_(SHR) 增殖,峰值抑制率为30.2%(P<0.01);细胞周期阻滞于G0/G1期的VSMC_(SHR)明显增多,最大阻滞率为36.4%(P<0.01),而缓激肽B2受体特异性阻断剂Hoe140逆转了hKLK的抑制作用.(3) hKLK1基因转移明显上调PDGF-BB诱导VSMC_(SHR)的p27~(Kip1)、p21~(Cip1)表达,Hoe140明显降低p27~(Kip1)、p21~(Cip1)表达.(4) hKLK1基因转移可明显抑制PDGF-BB诱导的VSMC_(SHR) 细胞迁移,抑制率为34.6%,且Hoe140不影响该抑制作用.结论:hKLK1基因转移可抑制PDGF-BB诱导的VSMC_(SHR)增殖,主要由缓激肽B2受体介导的,通过上调细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白p27~(Kip1)、p21~(Cip1)表达的途径.而hKLK1基因转移抑制VSMC_(SHR)迁移效应可能不通过B2受体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许昌声	福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所	103	593	13.0	18.0
2	朱鹏立	福建省立医院干部特诊二科	58	177	7.0	10.0
3	谢良地	福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所	131	585	13.0	18.0
4	王华军	福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所	62	464	13.0	18.0
5	余惠珍	福建医科大学附属第一医院福建省高血压研究所	25	52	4.0	6.0
9	李体远		24	83	6.0	8.0