肠道病毒71型(EV71)感染性克隆的构建

• 作者: 严延生 何爱华 周勇 张红榕 杨秀惠 林其财 潘伟毅 许江阳
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 感染性克隆 病毒拯救 体外转录 转染
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 413-416
• 分类号: R373.2
• 字数: 3321字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.05.003

摘要

目的 构建肠道病毒71(enterovrius 71,EV71)的感染性克隆,为研究EV71毒力基因及新型疫苗设计等建立一个技术平台.方法 用RT-PCR 方法扩增出EV71 FJ08149株全基因组,通过TA克隆组装进TOPO-XL-PCR 载体中,获得全长cDNA 克隆pFJ08149T5和pFJ08149T25.应用T7聚合酶系统在体外将线性化后全长cDNA克隆转录出RNA并转染RD细胞.通过间接免疫荧光试验、RT-PCR、序列测定及免疫电镜等对拯救病毒进行鉴定.结果 RNA转染后72 h观察到典型的肠道病毒致细胞病变,拯救病毒经RT-PCR、间接免疫荧光和免疫电镜检测鉴定为EV71型,表明已成功构建了EV71感染性克隆.结论 本研究成功构建出具有感染性的EV71全长cDNA克隆,为深入研究EV71的致病机制等提供了有利的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何爱华		23	150	8.0	10.0
2	杨秀惠		50	382	10.0	17.0
4	许江阳		7	57	4.0	7.0
5	张红榕		18	132	8.0	11.0
6	严延生		161	1086	15.0	24.0
8	周勇		88	488	11.0	15.0
9	潘伟毅		59	329	9.0	14.0
14	林其财		1	9	1.0	1.0