玉米大斑病菌STK1原核表达载体的构建及其表达

• 作者: 李坡 王宁 王文秀 范永山 董金皋 谷守芹
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 玉米大斑病菌 STK1 原核表达 Ris-6标签蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（18）
• 页码范围: 3876-3881
• 分类号: S8
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.18.024

摘要

[目的]构建玉米大斑病菌STK1原核表达载体并进行表达,以期得到带有His标签的目的蛋白.[方法]根据GenBank中STK1(AY849317)的cDNA序列及原核表达载体pET28a(+)中的多克隆位点设计引物,进行STK1 的克隆和原核表达载体的构建.将重组载体在原核表达体系中进行表达.通过SOS-PAGE电泳鉴定蛋白的表达,并利用western blot技术验证该蛋白是否为目的蛋白.[结果]STK1在大肠杆菌中的表达主要以包涵体形式存在;蛋白的分子量约为40.8 kD;经1mmol·L-1 IFTG在37℃下诱导,9 h后蛋白产量达到最高;经Western blot检测该表达产物具有His-6抗原性.[结论]玉米大斑病菌MAPK信号转导途径中的STK1在大肠杆菌中获得了表达,为今后STK1蛋白的多克隆抗体制备及功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宁	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	53	176	7.0	12.0
2	董金皋	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	210	2521	27.0	39.0
3	谷守芹	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	22	236	9.0	15.0
4	范永山	唐山师范学院生物系	59	433	12.0	18.0
5	王文秀	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	7	14	2.0	3.0
6	李坡	河北农业大学生命科学学院植物分子病理学实验室	5	80	4.0	5.0