布鲁菌病多重PCR快速检测方法的建立及应用

• 作者: 刘红彦 张三东 战美娜 李宇立 李河林 王晶钰 程媛媛
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 布鲁菌 外膜蛋白基因 多重PCR 检测
• 年，卷（期）: 2010,（z1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 5-9
• 分类号: QS852.614
• 字数: 3841字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.z1.002

摘要

根据GenBank中登录的布鲁菌(Brucella)omp31、bp26、omp10外膜蛋白基因序列,针对同一种病原,各设计合成了一对特异性引物,通过优化引物浓度组合,建立了检测布鲁菌 472 bp、290 bp、162 bp片段的多重PCR快速检测方法.通过对该方法的特异性、敏感性和重复性试验,结果显示,该方法从布鲁菌标准菌株中扩增出了特异性的目的片段,而对大肠埃希菌等细菌的扩增结果均为阴性.经过对10倍倍比稀释的模板进行检测,多重PCR的敏感度为最低可检出1.1×10-3ng的DNA,在感染布鲁菌病奶牛乳汁模拟标本中最低可检出细菌数为80 cfu/mL.不同人员用该方法重复检测,结果均一致,表明重复性好.应用该方法对88份临床疑似布鲁菌感染的奶牛乳样进行了检测,结果检出17份阳性,阳性检出率约为19.3%.检测结果表明,该方法具有特异、敏感、重复性好等优点,可用于奶牛布鲁菌病的临床检测及流行病学监测等.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晶钰	西北农林科技大学动物医学院	102	724	14.0	22.0
2	张三东	西北农林科技大学动物医学院	8	30	3.0	5.0
3	李宇立	西北农林科技大学动物医学院	5	18	2.0	4.0
4	程媛媛	西北农林科技大学动物医学院	5	15	1.0	3.0
5	刘红彦	西北农林科技大学动物医学院	7	23	2.0	4.0
6	李河林	西北农林科技大学动物医学院	5	20	2.0	4.0
7	战美娜	西北农林科技大学动物医学院	5	20	3.0	4.0