氯离子通道-3反义寡核苷酸对内皮素-1促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞的抑制作用

• 作者: 刘荣 张虹 李贵刚 胡维琨 谢二娟
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 氯离子通道-3 反义寡核苷酸 内皮素-1 增殖 角膜内皮细胞 牛
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 914-917,923
• 页数: 5页
• 分类号: R772.2
• 字数: 5458字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察氯离子通道-3(chloride channel 3,CIC-3)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,AS-ODN)对内皮素1(endothelin-1,ET-1)促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞(bovine corneal endothelial cells,BCECs)的抑制作用.方法 BCECs细胞悬液接种培养12 h后,通过脂质体介导转染不同浓度的ClC-3寡核苷酸.体外培养BCECs 24 h后加入200 pmol·L-1 ET-1,继续培养48 h.通过倒置荧光显微镜观察BCECs寡核苷酸的摄取.采用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法检测ClC-3 mRNA和蛋白的表达.采用MTT法观察BCECs增殖状况,计算细胞存活率,同时应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数.结果 寡核苷酸可被培养的BCECs摄取.ClC-3 mRNA与蛋白的表达变化呈平行关系.与不加时相比,ClC-3 AS-ODN浓度依赖性地减少BCECs ClC-3 mRNA和蛋白的表达,同样也浓度依赖性地降低BCECs MTT吸光度值(OD值)和细胞存活率.经100 mg·L-1ClC-3 ASODN处理后,与对照组相比,细胞G0/G1期细胞比例明显增高,S期及G2期细胞比例则明显降低,出现明显的凋亡峰,增殖指数明显下降.结论 ClC-3 AS-ODN可能通过减少ClC-3 mRNA和蛋白的表达,浓度依赖性抑制ET-1对体外培养BCECs的增殖作用,并使细胞周期停滞在G1期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张虹	华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科	129	576	12.0	16.0
2	李贵刚	华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科	88	408	11.0	15.0
3	胡维琨	华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科	34	226	8.0	14.0
4	谢二娟		17	37	4.0	5.0
5	刘荣	华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科	20	183	6.0	13.0