siRNA沉默Ppif基因表达对大鼠肾细胞增殖和凋亡的影响

• 作者: 叶章群 夏丁 夏宗禹 朱珉 胡威 陈刚 陈志强 马杰锋
• 来源期刊: 临床泌尿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 小干扰RNA Ppif基因 大鼠肾细胞
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 53-57
• 页数: 5页
• 分类号: R394.11
• 字数: 4100字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-1420.2010.01.020

摘要

目的:应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制大鼠基因Ppif的表达,探讨其对大鼠肾细胞(NRK)增殖和凋亡的影响.方法:体外化学合成针对Ppif基因的siRNA序列,在脂质体介导下转染NRK细胞.RT-PCR检测Ppif mRNA表达水平,Western blot检测Ppif蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡状况,MTT法检测细胞增殖活性.结果:Ppif siRNA转染NRK细胞24 h后,所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比,起始于405、556位点的siRNA在基因水平对Ppif无明显抑制效应(P>0.05);起始于198位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降75.25%(P<0.05);蛋白水平下降72.13%(P<0.05).MTT结果显示NRK细胞增殖能力显著增加.转染24 h后,siRNAl～siRNA4细胞抑制率分别为(68.6±3.6)%、(5.3±4.3)oA、(7.6±6.3)%和(4.1±4.5)%,凋亡率明显下降.结论:体外化学合成的Ppif siRNA (起始于198位点)可以有效地抑制NRK细胞Ppif的表达,从而抑制细胞凋亡,促进细胞增殖.