霍乱弧菌CT毒素环介导等温扩增技术快速检测方法的建立

• 作者: 吴晓芳 徐德顺 钟芬芳
• 来源期刊: 疾病监测
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱弧菌 环介导等温扩增技术 毒素基因ctxA 检测
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 580-584
• 分类号: R516.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3784/j.issn.1003-9961.2010.07.023

摘要

目的 将一种新颖的核酸扩增技术--环介导等温扩增技术(LAMP)应用于霍乱弧菌毒素基因ctxA的快速检测.方法 针对霍乱弧菌毒素基因ctxA设计6条特异性引物(两条内引物、两条外引物和两条环引物)进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化.并考核方法的敏感性和特异性.结果 最佳反应时间为60 min,反应温度为65℃.对8种相关肠道细菌进行LAMP扩增,仅含毒素基因ctxA的霍乱弧菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性.霍乱弧菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别约为68龟和42cfu/ml.对模拟样品进行直接检测,检测限为72 cfu/g.结论 该方法检测霍乱弧菌毒素基因ctxA特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低,1h即可完成,适合基层检验部门使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐德顺		59	129	6.0	9.0
2	吴晓芳		48	85	5.0	7.0
3	钟芬芳		1	2	1.0	1.0