山核桃干腐病菌环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测体系的建立

• 作者: 吴莹莹 张传清 张佳星 张宇 王叶青 童琪
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 山核桃干腐病 茶蔗子葡萄座腔菌 环介导等温扩增技术(LAMP)
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 页码范围: 87-91,100
• 页数: 6页
• 分类号: S512.1+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2018.0084

摘要

为了建立一种能够快速、准确、高效地检测山核桃干腐病菌的技术,本研究根据茶蔗子葡萄座腔菌的β-tubulin基因序列设计外引物、内引物和环引物,并对扩增体系和条件进行了优化、并分析其特异性和灵敏度.结果使用羟基萘酚蓝(H NB)作为反应指示剂,反应体系(Bst DNA聚合酶0.16U/μL,外引物F3和B3均为0.2 μmol/L,内引物FIP和BIP均为1.6 μmol/L,环引物LB为0.8μmol/L,Mg2+为4 mmol/L,dNTP为1 mmol/L,甜菜碱Betaine为0.6 mmol/L)在等温(64℃)条件下反应1h能特异性检测山核桃干腐病菌:以山核桃干腐病菌DNA为模板的反应液呈阳性(变为蓝色),而其余的病菌均为阴性(仍为紫色),该技术的最低检测限为1 pg/μL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴莹莹	浙江农林大学林业与生物技术学院	1	1	1.0	1.0
2	王叶青	浙江农林大学农业与食品科学学院	1	1	1.0	1.0