PNP-CD融合自杀基因系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

• 作者: 严武 尹震宇 彭友缘 蔡晓坤
• 来源期刊: 中华肝胆外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,肝细胞 PNP/MeP-dR系统 CD/5-FC系统 融合自杀基因 基因治疗
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 624-627
• 分类号: R73
• 字数: 2983字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-8118.2010.08.020

摘要

目的 分析PNP-CD融合自杀基因系统对肝癌细胞HepG2的杀伤作用并探讨其可能的机制.方法 利用重组PCR定点诱变法制备融合基因PNP-CD.将PNP-CD插入真核表达载体pcDNA3.0中,构建融合自杀基因表达载体pcDNA3.0/PNP-CD.经酶切、PCR及测序鉴定重组体,G418筛选获得稳定转染pcDNA3.0/PNP-CD的抗性细胞克隆.用RT-PCR和Western Blotting法检测PNP-CD基因在HepG2细胞中的表达.用台盼蓝排斥法检测细胞生长曲线,用MTT法检测细胞细胞克隆对相应前药敏感性及所导致的旁观者效应.结果 融合基因片段PNP-CD正确插入了pcDNA3.0中,pcDNA3.0/PNP-CD在HepG2细胞中实现了表达.细胞抗性克隆对特定的前药高度敏感.在两种前药联合作用下,pcDNA3.0/PNP-CD所致旁观者效应明显强于只给予MeP-dR一种前药所致旁观者效应.结论 具有双自杀基因功能的PNP-CD融合基因系统是肝癌基因治疗中一种高效治疗载体,对肝癌细胞有着良好的杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹震宇	厦门大学附属中山医院肝胆外科	28	122	7.0	9.0
2	彭友缘	厦门大学附属中山医院肝胆外科	8	36	4.0	6.0
3	严武	厦门大学附属中山医院肝胆外科	8	39	4.0	6.0
4	蔡晓坤	厦门大学附属中山医院肝胆外科	1	0	0.0	0.0