传染性支气管炎N基因克隆及在大肠杆菌中的可溶性表达

• 作者: 呼延蓉 李明义 郭伟伟 黄保续
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡传染性支气管炎病毒(IBV) 核蛋白基因 克隆 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 35-38
• 页数: 4页
• 分类号: S852.618
• 字数: 4195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2010.04.019

摘要

核衣壳蛋白(N)是鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的重要结构蛋白.根据GenBank报道的IBV的M41株的N基因序列设计一对引物,从提取的M41株的RNA中利用RT-PCR技术扩增荻得了约1.23kb的片段,将该片段插入克隆载体pMD18-T,经测定核苷酸序列证实N基因扩增正确,表明已成功构建pMD18-T-N.再将pMD18-T-N用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切,将酶切后的N基因片段克隆到表达载体pET-32a,转化入大肠杆菌Rossetta中,用IPTG诱导,进行SDS-PAGE电泳,电泳结果显示外源基因获得了表达且为可溶性蛋白,Western-blotting检测表明N蛋白可与相应IBV病毒抗体发生特异性的反应,表明N蛋白有一定的生物活性,可为用于生产检测IB的诊断试剂和研制新型IB重组亚单位疫苗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄保续		85	586	14.0	20.0
2	李明义		25	135	7.0	10.0
3	郭伟伟		10	25	3.0	4.0
4	呼延蓉	东北农业大学动物医学院	1	6	1.0	1.0