传染性支气管炎病毒NP基因在大肠杆菌中的可溶性表达

• 作者: 周欣 姚慧霞 王新卫 王泽霖 郝春丽
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 传染性支气管炎病毒(IBV) 核蛋白 表达
• 年，卷（期）: 2007,（34）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 11022-11023,11109
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 2515字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2007.34.044

摘要

[目的]生产具有生物活性的、可用于临床检测的NP融合蛋白抗原,建立可用于临床检测IB抗体诊断的试剂盒.[方法]利用RT-PCR技术扩增传染性支气管炎病毒M41株的NP基因,将之克隆并重组于原核表达载体pET-28a,经PCR、酶切鉴定及序列分析构建重组表达载体pET-NP,研究NP基因在大肠杆菌中的可溶性表达.[结果]将重组载体pET-NP转化表达菌BL21,获得阳性重组菌pET-NP-BL.阳性重组子经IPTG诱导后,目的基因NP获得了高效表达.表达产物经过SDS-PAGE与Western blot检测表明,NP分子量约为49 kD,且以可溶性蛋白形式存在;表达产物可与特异性传染性支气管炎病毒抗血清发生免疫反应.表达产物可以用作检测IB抗体的抗原.[结论]该融合蛋白可用于生产检测IB的诊断试剂,生物安全性高,生产方便.但尚需建立适当的检测方法,进一步研究其实际诊断价值.同时也可以研制新型IB重组亚单位疫苗,进一步研究其刺激动物机体产生的细胞与体液免疫,深入研究新功能,筛选新的抗原表位,为生产新型IB基因工程疫苗奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王泽霖	河南农业大学牧医工程学院	53	377	11.0	16.0
2	周欣	河南农业大学牧医工程学院	10	51	4.0	7.0
3	王新卫	河南农业大学牧医工程学院	109	292	8.0	11.0
4	郝春丽	河南农业大学牧医工程学院	8	53	5.0	7.0
5	姚慧霞	河南农业大学牧医工程学院	4	20	3.0	4.0