HRE增强hTERT启动子-tk/GCV基因系统对缺氧环境肿瘤细胞的杀伤作用

• 作者: 张玉静 胡薇 艾永兴 郑梅竹
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤 hTERT启动子 缺氧反应元件 HSV-tk基因 缺氧
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 14-19,封2
• 页数: 7页
• 分类号: R730.54|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨缺氧反应元件(HRE)增强hTERT启动子-tk/GCV逆转录病毒基因系统对缺氧环境肿瘤细胞的体外杀伤作用.方法:构建由HRE缺氧反应元件修饰的hTERT杂合启动子和hTERT单一启动子引导单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因表达的重组逆转录病毒载体,在脂质体介导下分别转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆.将重组病毒感染人肺癌细胞SPC-A1和人肝癌细胞Bel-7402,G418筛选出抗性克隆肿瘤细胞.实验分为对照组、SPC-Al/tk组和Bel-7402/tk组.在缺氧处理条件下,MTT法检测前体药物丙氧鸟苷(GCV)对SPC-A1/tk和Bel-7402/tk细胞的杀伤效应,流式细胞仪检测其细胞凋亡率和细胞周期的变化.结果:与对照组比较,缺氧环境培养的SPC-A1/tk和Bel-7402/tk细胞对GCV的敏感性明显增强,其中细胞凋亡率明显升高(P<0.001),细胞周期各期细胞数有所减少(P<0.05).与hTERT启动子引导的tk基因系统组细胞比较,[HRE]hTERT杂合启动子引导的tk基因系统组肿瘤细胞存活率更低(P<0.01),诱导肿瘤细胞凋亡率明显升高(P<0.01),G_1期和G_0期细胞数有所增高(P<0.05),S期细胞数减少(P<0.05).结论:HRE能增强hTERT启动子-tk/GCV自杀基因系统对缺氧环境中肿瘤细胞的体外杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑梅竹	吉林大学人兽共患病研究所	12	37	4.0	5.0
2	艾永兴	吉林大学人兽共患病研究所	23	41	4.0	5.0
3	张玉静	吉林大学人兽共患病研究所	49	120	6.0	7.0
4	胡薇	吉林农业大学生命科学学院生物化学教研室	44	146	7.0	9.0