IgE低亲和力受体基因的克隆、表达及初步鉴定

• 作者: 付琛颖 尹晴 朱勇 李珍 王萍 董文其 邱国真 陈白虹 魏威
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IgE 低亲和力受体 表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 538-541
• 分类号: R392
• 语种: 中文

摘要

目的 利用基因重组的方法建立IgE低亲和力受体(FceR Ⅱ)基因的原核表达系统.方法 用RTPCR方法从过敏性疾病病人外周血淋巴细胞扩增FceR Ⅱ cDNA基因,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,构建原核表达载体 FceR Ⅱ-pGEX-4T-1,将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta,诱导表达FceR Ⅱ蛋白,通过割胶回收纯化,并用Western blot检测FceR Ⅱ的表达.结果 测序表明所扩增FceR Ⅱ cDNA基因,与已报道的序列一致.获得的重组蛋白经Western blot鉴定可以和人IgE特异性结合.结论 成功构建了FceR Ⅱ-pGEX-4T-1表达载体,获得了能和人lgE特异性结合的重组蛋白,为下一步FceR Ⅱ单克隆抗体的制备及应用研究打下了基础.