烤烟烟叶胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶分离条件的优化

• 作者: 刘卫群 杜铮 王彩霞 贾峰 魏庆华 黄晓书
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 反相高效液相色谱 烤烟烟叶 5-甲基胞嘧啶 胞嘧啶
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 94-97
• 分类号: S572-34
• 字数: 2339字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4942.2010.06.029

摘要

通过不同流动相、测定温度、流速的对比,优化了分离烟叶总DNA中胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的高效液相色谱法.烤烟烟叶DNA采用CTAB法提取,高氯酸水解,用KOH调节pH到3～5,取上清液测定.色谱柱为Nucleosil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm).优化后测定条件为:流动相采用甲醇∶5 mmol/L戊烷磺酸钠(10∶90,V/V),流速0.7 ml/min,柱温30℃,检测波长273 nm,进样量20 μl.该方法简化了流动相的配制,缩短了分离时间,胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的加标回收率分别为103.50%和96.67%,相对标准偏差为2.35%和2.80%.用该方法研究烤烟烟叶发育过程中总DNA胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的含量,效果良好,符合烟叶生长发育规律.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾峰	河南农业大学烟草学院	15	142	6.0	11.0
2	刘卫群	河南农业大学生命科学学院	94	1777	23.0	39.0
3	王彩霞	河南农业大学烟草学院	67	244	8.0	10.0
4	魏庆华	河南农业大学烟草学院	5	24	3.0	4.0
5	杜铮	河南农业大学烟草学院	4	24	3.0	4.0
6	黄晓书	河南省高等学校农业生物技术与工程技术重点学科开放实验室	4	21	3.0	4.0