猪圆环病毒2型ORF2基因片段的克隆与原核表达

• 作者: 史平玲 张改平 李学伍 游雷鸣 王爱萍 祁艳华 胡峰
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 ORF2基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 112-115
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2010.03.033

摘要

为在原核表达系统中表达猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因片段,提取感染PCV2的细胞基因组DNA,PCR扩增ORF2基因片段并克隆至pMD-18T载体上,经PCR、酶切及测序鉴定后,将该基因重组至pET-28a原核表达载体,构建了表达载体pET-28a-ORF2.该重组质粒在大肠杆菌BL21中经1mmol/L IPTG于37℃诱导5h得到最佳表达.表达重组蛋白的分子量为26.0kD,以包涵体形式存在.Western-Blot分析表明,该重组蛋白与PCV2阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的反应原性.