Cyclin G1介导孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用实验研究

• 作者: 丁小玲 于海礼 何亚平 刘芳 岳利民 张金虎 方明 袁东智
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期蛋白G1(cyclin G1) 子宫内膜 孕激素 siRNA
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 2191-2194
• 分类号: R339.22
• 字数: 3506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2010.12.002

摘要

目的 探讨孕激素依赖的cyclin G1是否介导了孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用.方法 运用RNA干扰技术(RNAi)使cyclin G1基因表达沉默,观察孕激素所致小鼠子宫内膜上皮细胞增殖抑制作用的变化.针对cyclin G1基因设计并化学合成cyclin G1的小干扰RNA(G1-siRNA)和与cyclin G1序列无同源性的siRNA(control-siRNA)作为阴性对照,两种siRNA均在其正义链的5'端加上荧光标记物Cy3.随机选取9只去势12天的成年雌性小鼠,连续2天皮下注射雌激素(100ng/次·只).末次皮下注射雌激素19小时后,将Lipofectamin 2000与G1-siRNA(200nmol/ml)和control-siRNA(200nmol/ml)的混合液分别注射入同一小鼠的两侧子宫.5小时后,实验小鼠皮下注射孕激素(2mg/只).于孕激素注射24小时后,切取两侧子宫.冰冻切片后,荧光显微镜观察,以在子宫内膜上皮细胞中见到Cy3发出红色荧光作为判断RNA被子宫内膜层有效吸收的依据.确定siRNA被有效吸收后,应用免疫组化检测对照组和实验组子宫内膜中cyclin G1的表达和反映细胞增殖活性的增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 免疫组织化学染色结果显示,实验组子宫内膜上皮细胞内cyclin G1表达明显减弱,而PCNA的蛋白表达明显增强,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 cyclin G1至少部分介导了孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖的负调控作用,为进一步探索和治疗子宫内膜癌提供了新的依据.