花粉介导法将萝卜抗菌肽基因导入野罂粟的影响因素研究

• 作者: 何庆祥 张金文 魏玉杰
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 野罂粟 花粉介导法 基因转化
• 年，卷（期）: 2010,（15）
• 页码范围: 32-37
• 分类号: S336
• 字数: 4563字
• 语种: 中文

摘要

以野罂粟开放花蕾为受体,栽有萝卜抗菌肽AFP(antifungal protein)基因的质粒pBIAFP为供体,在不同浓度的蔗糖溶液中,加入新鲜花粉与含有目的基因的质粒DNA,应用SKH250LH型超声波震荡器进行震荡处理得到花粉处理液,在不同的时间用带有Coolsnap的OLYPuS光学显微镜下观察野罂粟花粉萌发情况;在不同授粉时间后,辅以人工授粉的方法将花粉处理液滴注野罂粟柱头上,套袋后获得种子,测定其结实率.实验证明:利用花粉介导法进行萝卜抗菌肽基因转化,以蔗糖浓度11%,处理后10-15 h后的野罂粟花粉萌发最好;在蔗糖浓度8%的溶液中,以5 h的结籽量较好.后代经卡那霉素筛选和PCR检测,初步证明外源AFP基因整合到野罂粟基因组中,并获得转基因T1代.为特殊中药材育种提供一个新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张金文		110	1086	18.0	25.0
2	魏玉杰		44	130	7.0	9.0
3	何庆祥		43	184	7.0	11.0