大鼠血管内皮祖细胞培养及鉴定

• 作者: 刘煜敏 孔朝红 朱江 道文欣
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: 内皮祖细胞 骨髓 细胞培养
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学论著/研究
• 页码范围: 563-565
• 分类号: R329.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-1349.2010.05.030

摘要

目的 探索骨髓来源的血管内皮祖细胞的分离培养方法,为缺血性疾病治疗找到新的移植细胞来源.方法 采集SD雄性大鼠骨髓细胞,用梯度密度离心法分离单核个细胞,种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿中培养,将血管内皮生长因子(VEGF)、重组纤维细胞生长因子(bFGF)和重组上皮生长因子(EGF)作为诱导剂,将72 h后贴壁细胞(A组)和非贴壁细胞(B组)分别培养,观察细胞形态的变化以及数量变化,取A组在第14天,应用免疫组化和免疫荧光技术鉴定内皮祖细胞系列标志.结果 A组细胞经过体外诱导后大量扩增,在28 d时仍有强大扩增的活力,呈铺路石样,而B组细胞短期内可以大量增殖,呈长索样,之后逐渐变少;在细胞迁移实验中,A组细胞可以相互融合形成血管结构,而B组细胞之间则不能融合,随着时间推移,逐渐凋亡;A组经过CD34免疫荧光、CD133、FLK-1免疫组化鉴定呈阳性,并能特异性吸附FITC-UEA-和内吞DIL-Ac-LDL.结论 自体骨髓细胞通过贴壁换液后可以分离培养出内皮祖细胞,取贴壁细胞经过体外诱导后大量扩增,并通过表面标记物鉴定可以确认为内皮祖细胞,而非贴壁细胞不能大量增殖,故将贴壁分离方法来筛选内皮祖细胞,此方法简易,并能满足细胞移植的需要,因而,在移植治疗脑缺血引起的内皮损伤应该有较好的临床应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘煜敏		86	522	11.0	19.0
2	孔朝红		29	102	6.0	8.0
3	朱江		11	38	4.0	6.0
4	道文欣		4	11	3.0	3.0