上调stathmin基因表达对食管鳞癌EC9706细胞的作用

• 作者: 何炜 李克 樊青霞 王峰 王瑞林 王留兴 赵培荣
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 食管肿瘤 转染 细胞周期 Stathmin基因 EC9706细胞
• 年，卷（期）: 2010,（30）
• 页码范围: 2140-2144
• 分类号: R73
• 字数: 3844字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2010.30.014

摘要

目的 构建stathmin基因真核表达载体,研究上调stathmin基因表达对食管癌细胞EC9706的作用.方法 采用RT-PCR扩增stathmin cDNA,克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体.重组载体经脂质体转染EC9706细胞,G418筛选获得稳定转染细胞株.显微镜观察转染细胞形态学变化,Western印迹法检测转染细胞stathmin蛋白的表达.选取稳定转染的细胞株,采用细胞计数法绘制细胞生长曲线,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖活性,平板克隆形成实验观察细胞克隆形成,流式细胞仪分析细胞周期,裸鼠移植瘤实验研究转染细胞的成瘤性.结果 RT-PCR扩增获得450 bp的cDNA编码序列;克隆至pcDNA3.1(+)载体,获得pcDNA3.1-stathmin重组表达载体.Western印迹法证实重组载体上调EC9706细胞stathmin蛋白表达,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组细胞比较,pcDNA3.1-stathmin转染细胞形态变大、多核、有丝分裂障碍;pcDNA3.1-stathmin转染细胞倍增时间延长(25～28 h)、增殖活性降低、细胞克隆形成率下降(34.5%±6.9%),细胞分裂阻滞于G2/M期(21.7%±3.4%),裸鼠体内致瘤性降低,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论 重组质粒pcDNA3.1-stathmin上调stathmin基因表达能够抑制食管鳞癌EC9706细胞的增殖和致瘤性,stathmin可能成为食管鳞癌患者治疗的理想靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊青霞	郑州大学第一附属医院肿瘤科	283	1373	16.0	22.0
2	王瑞林	郑州大学第一附属医院肿瘤科	104	533	11.0	16.0
3	王留兴	郑州大学第一附属医院肿瘤科	158	792	14.0	19.0
4	王峰	郑州大学第一附属医院肿瘤科	120	477	11.0	17.0
5	何炜	郑州大学第一附属医院肿瘤科	56	282	8.0	14.0
6	赵培荣	郑州大学肿瘤中心	50	299	8.0	14.0
7	李克	郑州大学第一附属医院肿瘤科	29	102	6.0	9.0