大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的培养、鉴定及体外特性初步研究

• 作者: 卢仲毅 方芳 符跃强 蒋静 许峰 陈娟 陈聪
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肺泡Ⅱ型上皮细胞 细胞培养 改良巴氏染色 板层小体
• 年，卷（期）: 2010,（15）
• 页码范围: 1988-1990
• 分类号: R329.2|R322.35
• 字数: 3406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2010.15.021

摘要

目的 建立成年大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ细胞)分离、纯化、原代培养和鉴定的技术方法,并观察其体外生长特性及SP-A表达情况.方法 将0.08%胰蛋白酶消化液从气管注入肺组织,消化分离ATⅡ细胞.将大鼠IgG包被的培养皿免疫吸附纯化后,进行原代培养.用倒置相差显微镜观察细胞生长情况,透射电镜(TEM )鉴定细胞,改良巴式染色法鉴定并计算细胞纯度,MTT法检测细胞增殖情况,Western blot检测细胞表达SP-A动态变化.结果 细胞产量约为2.2×107个/只大鼠.电镜下观察到ATⅡ细胞特征性结构--板层小体;纯度大于 90%.体外培养36～72 h时细胞生长良好,细胞质内有较多颗粒;96 h后细胞呈长索形,细胞内颗粒减少,并出现空泡.ATⅡ细胞表达SP-A在36 h左右达高峰,之后表达减弱.结论 利用0.08%胰蛋白酶消化分离和大鼠IgG免疫吸附纯化可获得满意的原代ATⅡ细胞.培养36～72 h时细胞增殖旺盛,生长良好,SP-A表达丰富,是进行体外实验的良好时期.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢仲毅	重庆医科大学附属儿童医院急诊科	68	1026	17.0	30.0
2	许峰	重庆医科大学附属儿童医院急诊科	141	860	15.0	24.0
3	方芳	重庆医科大学附属儿童医院急诊科	29	155	8.0	12.0
4	陈娟	重庆医科大学附属儿童医院急诊科	35	122	7.0	8.0
5	陈聪	重庆医科大学附属儿童医院急诊科	4	14	2.0	3.0
6	蒋静	重庆医科大学附属儿童医院急诊科	7	19	2.0	4.0
7	符跃强	南京医科大学附属南京儿童医院急诊科	2	14	2.0	2.0