大鼠肝卵圆细胞的增殖模型建立和体外分离培养、诱导分化研究

• 作者: 冉江华 刘静 张升宁 李来邦 李立 李铸 陈娟
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 肝卵圆细胞 细胞分离 培养 分化
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 663-666,671
• 页数: 5页
• 分类号: R-332
• 字数: 4107字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立大鼠肝卵圆细胞(HOC)的增殖模型,探讨分离培养及鉴定HOC的方法.方法 采用2-乙酰氨基芴/部分肝切除术刺激建立成体大鼠肝卵圆细胞增殖模型,于肝切除术后第12天切取剩余肝脏,使用胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞,免疫荧光技术和KT-PCK分析法检测肝卵圆细胞标志物mRNA表达.行体外培养并添加干细胞生长因子(SCF)、肝细胞生长因子(HGF)和表皮生长因子(EGF)诱导其分化.结果 分离得到的肝卵圆细胞存活率达到90%,经c-kit免疫荧光显色,PCR 分析显示有CK19和白蛋白mRNA表达.生长因子诱导下有向胆管细胞和肝细胞分化的特性.结论 肝卵圆细胞分离纯化及鉴定方法和肝卵圆细胞成功培养,为进一步研究肝干细胞生物学特性和与肝癌的关系提供了物质基础.