小G蛋白Cdc42对人结肠癌奥沙利铂耐药细胞多药耐药性的影响

• 作者: 刘桢 唐秋琳 岳彩霞 张又 李楠静 李立兰 毕锋 魏雯
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Cdc42 奥沙利铂 多药耐药性 结肠癌
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 466-470
• 分类号: R735.35
• 语种: 中文

摘要

目的 研究细胞分裂周期蛋白(cell division cycle 42,Cdc42)对人结肠癌奥沙利铂耐药细胞系多药耐药性的影响.方法 Western blot检测人结肠癌SW480、Colo320细胞与已成功构建的奥沙利铂耐药细胞系SW480/L-OHP、Colo320/L-OHP细胞中Cdc42的表达,用LipofectamineTM 2000介导重组质粒pDEST26-His-Cdc42转染入Cdc42表达相对较低的亲代细胞系,介导Cdc42 siRNA转染入Cdc42表达相对较高的耐药细胞系.Western blot和RT-PCR检测转染是否成功.利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测各细胞系5氟尿嘧啶、顺铂、奥沙利铂,紫杉醇,依托泊苷,长春新碱,阿霉素等结直肠癌常用化疗药物的药物敏感性,计算出各种药物的半数致死浓度(IC50).行Western blot检测不同细胞系P-gp、MRP1蛋白表达水平.结果 在耐药细胞系中Cdc42的表达高于亲代细胞系.成功转染外源Cdc42基因的亲代细胞CCK-8(CCK-8)法检测对多种化疗药物的IC50以及P-gp、MRP1蛋白表达水平高于未转染细胞系.成功转染Cdc42 siRNA的耐药细胞CCK-8法检测对多种化疗药物的IC50显著低于耐药细胞系.结论 Cdc42与人结肠癌细胞耐药性形成有关,Cdc42可增强人结肠癌细胞的多药耐药性的形成.提示Cdc42可能成为降低结肠癌细胞多药耐药性的分子靶点.