结缔组织生长因子和金属蛋白酶组织抑制因子-1RNA干扰靶位的筛选

• 作者: 刘加群 孙华丽 张建军 蒋玉凤 黄飞
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝纤维化 结缔组织生长因子 金属蛋白酶组织抑制因子-1 肝星状细胞 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 246-248,252
• 分类号: R575.2
• 字数: 2878字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2011.04.003

摘要

目的 筛选能有效抑制肝纤维化形成的结缔组织生长因子(CTGF)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的RNA干扰靶位.方法 根据大鼠CTGF 和TIMP-1基因序列,分别设计3个RNA干扰候选靶位,化学合成双链RNA(dsRNA),各自转染或不同组合后转染经TGF-β1刺激活化的大鼠肝星状细胞(HSC),48h后抽提RNA并逆转录成cDNA,采用荧光定量PCR法测定并计算CTGF和TIMP-1、Ⅰ型前胶原(procol-α1)mRNA的相对表达量与抑制率,采用RIA法检测 HSC培养上清液肝纤维化指标.结果 在进行单独针对CTGF基因干扰时,CTGF-3组对CTGF mRNA及其下游产物Procol-α1 mRNA的转录抑制作用最佳(抑制率分别达68.09%与65.03%),在单独针对TIMP-1基因干扰时,TIMP-1-3组对TIMP-1 mRNA及其下游产物Procol-α1 mRNA的转录抑制作用最佳(抑制率分别达68.55%与62.84%);在联合干扰时,CTGF-3/TIMP-1-3组联合对CTGF mRNA和TIMP-1 mRNA的抑制最强(抑制率分别达76.60%与79.03%),而以CTGF-2/TIMP-1-3组联合对Procol-α1 mRNA的抑制作用最强(抑制率达85.79%).结论 成功筛选出针对CTGF和TIMP-1最有效的RNA干扰靶位,联合干扰较单独干扰效果更强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建军	泸州医学院附属医院感染病科	48	144	7.0	10.0
2	蒋玉凤	泸州医学院附属医院感染病科	22	85	5.0	8.0
3	孙华丽		3	8	2.0	2.0
4	黄飞	湖北省荆州市中心医院感染病科	10	13	2.0	2.0
5	刘加群		3	8	2.0	2.0