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TIZ基因mRNA在卵巢癌细胞系中的表达及其RNA干扰载体构建
TIZ基因mRNA在卵巢癌细胞系中的表达及其RNA干扰载体构建
作者:
张玮
李力
赵冰冰
阳志军
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
TIZ基因
卵巢癌细胞
siRNA
摘要:
目的 检测卵巢癌细胞株中TIZ基因的mRNA表达水平,并构建TIZ基因的特异性RNA干扰(RNAi)载体.方法通过RT-PCR方法 检测卵巢癌细胞系(SKOV3、SKOV3顺铂耐药细胞、SKOV3卡铂耐药细胞、A2780、A2780卡铂耐药细胞、H08910)中TIZ mRNA的表达;根据Genebank上TIZ的mRNA序列,设计5对siRNA干扰片段,采用脂质体转染法介导siRNA干扰片段并下调卵巢癌细胞系中TIZ mRNA的表达.采用pTG19-T质粒构建TIZ和β-actint mRNA表达重组质粒并制备其标准品.采用实时定量PCR (QRT-PCR)检测siRNA干扰片段对IZ基因的下降效率,并筛选最佳siRNA干扰片段.以pGPU6/GFP/Neo载体和质粒DNA测序方法 构建pGPU6/GFP/NeosiRNA-TIZ-573重组质粒.结果 ①除卵巢癌细胞HO8910细胞无TIZ基因mRNA表达外,其余细胞均有TIZ基因mRNA表达.②细胞siRNA干扰片段筛选结果 显示介导TIZ-573片段后可下调60%细胞TIZ mRNA表达.③成功构建了TIZ基因RNAi载体pGPU6/GFP/Neo-TIZ-573.结论 多数卵巢癌细胞系表达TIZ mRNA.siRNA-TIZ-573为最佳下调细胞TIZ mRNA片段.构建的pGPU6/GFP/Neo-TIZ-573重组质粒可用于下一步的实验研究.
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文献信息
篇名
TIZ基因mRNA在卵巢癌细胞系中的表达及其RNA干扰载体构建
来源期刊
中国癌症防治杂志
学科
医学
关键词
TIZ基因
卵巢癌细胞
siRNA
年,卷(期)
2011,(3)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
187-191
页数
分类号
R737.31
字数
4032字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1674-5671.2011.03.02
五维指标
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引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
TIZ基因
卵巢癌细胞
siRNA
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国癌症防治杂志
主办单位:
中国医师协会
广西肿瘤防治研究所
出版周期:
双月刊
ISSN:
1674-5671
CN:
45-1366/R
开本:
大16开
出版地:
广西南宁市河堤路71号
邮发代号:
48-33
创刊时间:
1984
语种:
chi
出版文献量(篇)
1488
总下载数(次)
0
总被引数(次)
4544
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